|
Гистохимические исследования:
Методика окраски по Ли (выявление повреждений миокарда различного генеза гематоксилином-основным фуксином-пикриновой кислотой (ГОФПК).
Данная методика позволяет выявить ранние ишемические повреждения миокарда (изменения миокарда на ранних стадиях инфаркта), а также патологию миокарда некоронарогенного происхождения.
Фиксация материала в 10% забуференном формалине. Срезы парафиновые.
РЕАКТИВЫ:
Раствор А. Состав и способ приготовления:
- квасцы алюминиево-аммонийные - 6 г
- гематоксилин - 0,5 г
- желтая окись ртути - 0,25 г
- дистиллированная вода 70 мл
Раствор кипятить 10 мин., охладить, добавить
- глицерин - 30 мл
- ледяную уксусную кислоту - 4 мл.
Раствор В.
- 0,1 % раствор основного фуксина в дистиллированной воде. Может употребляться многократно (после сливания с окрашенных срезов).
Раствор С.
- 0,1 % раствор пикриновой кислоты в абсолютном ацетоне.
Окрашивание:
1.Срезы депарафинировать.
2.Промыть дистиллированной водой.
3.Окрашивание раствором А, 10 - 30 сек.
4.Промывание в проточной воде, 5 мин.
5.Окрашивание раствором В, 3 - 6 мин.
6.Ополаскивание в дистиллированной воде, 5 - 10 сек.
7.Ополаскивание в абсолютном ацетоне, 5 - 10 сек.
8.Дифференцировать в растворе С, 20 сек. (для животных - 15 сек.).
9.Быстрое споласкивание в абсолютном ацетоне, 5 сек.
10.Просветление в ксилоле.
11.Заключить в бальзам или полистирол.
Примечание: все манипуляции проводятся при комнатной температуре. Раствор С и все жидкости, в которых промывают срезы, менять после каждых 5 - 6 срезов.
Результат: миокард с неизмененной структурой - желтого цвета, зоны гипоксического повреждения, некротизированные и некробиотические мышечные волокна (фуксиноррагия по Ли) - красного, рубцовая соединительная ткань - серо-сиреневого цвета, эластические волокна - ярко-красные, гранулы тучных клеток - вишнево-красные с различным оттенком, эритроциты - ярко-красные.
Микроскопическая диагностика раннего инфаркта миокарда.
Нарушения энергетического обмена достаточно быстро отражаются на состоянии сократительного аппарата мышечных клеток сердца - миофибриллах, в которых возникают стереотипные изменения различной степени выраженности:
Контрактурные повреждения, отражающие патологическое тотальное или очаговое сокращение миофибрилл;
Внутриклеточный миоцитолиз, характеризующийся очаговым лизисом миофибрилл;
Глыбчатый распад миофибрилл, возникающий в результате одномоментного мозаичного сокращения групп саркомеров и лизиса не сократившихся участков миофибрилл.
Характер изменений миофибрилл определяет тинкториальные свойства саркоплазмы поврежденных кардиомиоцитов.
Морфометрический метод:
ИНДЕКС КРОВОСНАБЖЕНИЯ МИОКАРДА
(Митрофанова Л.Б., Аминева Х.К. Макроскопический и органометрический анализ сердца в патологии. Пособие для врачей. – СПб: ГПАб, вып. 21, 1998. – 60с.)
Индекс кровоснабжения миокарда отражает адекватность кровоснабжения миокарда, выявляет его дефицит; демонстрирует, какую массу миокарда обеспечивает 1мм2 площади сосуда. Для его вычисления необходимо определить чистую массу сердца (миокарда):
МС- масса сердца,
ЧМС=МС-ЭЖ,
Где ЭЖ – масса эпикардиального жира с крупными сосудами.
Затем вычисляется суммарная площадь просвета артерий:
S=L12+L22+L32/4,
Где L – периметр коронарной артерии (ЛОА, ПМЖВ, ПКА в самых узких частях проксимальной трети).
ИКМ определяется по формуле:
ИКМ=ЧМС/S(г/мм2)
Например, масса сердца 650г, эпикардиального жира – 50г, периметр ПМЖВ 3мм, ЛОА – 2 мм, ПКА – 10мм.
ЧМС=650-60=600г
S=32+2 2+10 2/4П=113/12,56=8,99мм
ИКМ=600/8,99=66,7г/мм2
Данный показатель – высокоинформативный индикатор ишемии миокарда. Его значения от 21,5 до 25 г/мм2 соответствуют стенокардии при кардиомиопатии и миокардите.
25-39г/мм2 наблюдается у лиц с постинфаркным кардиосклерозом.
40г/мм2 и более свидетельствует об острой ишемической катастрофе – ОКН или инфаркте миокарда.
Источник: ihc.ucoz.ru
|
|
